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Qualité

Lire un certificat d’analyse (COA) de peptide

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Un COA à 99 % peut décrire un flacon dont moins de 70 % de la masse est du peptide. La différence tient à une ligne que la plupart des fournisseurs omettent.

Le certificat d'analyse est le seul document qui relie ce que vous avez acheté à ce qui se trouve dans le flacon. Encore faut-il le lire pour ce qu'il dit, et non pour le chiffre mis en avant sur la fiche produit.

Pureté chromatographique ≠ teneur en peptide

C'est la confusion la plus coûteuse du secteur. La pureté HPLC exprime la proportion du signal chromatographique attribuable au pic principal : elle vous dit quelle fraction des espèces peptidiques détectées est le bon peptide. Elle ne dit rien de ce qui n'absorbe pas à la longueur d'onde utilisée.

Or un flacon de peptide lyophilisé contient aussi des contre-ions (typiquement du trifluoroacétate issu de la purification), de l'eau résiduelle et des sels. Ce complément représente couramment 15 à 30 % de la masse. Un peptide à 99 % de pureté HPLC peut donc ne représenter que 70 % de la masse pesée dans le flacon — et si vous calculez votre molarité à partir de la masse nominale, votre concentration réelle est inférieure d'un tiers à celle que vous croyez.

La teneur nette en peptide (peptide content), mesurée par analyse d'acides aminés ou par dosage de l'azote, est la ligne qui lève cette ambiguïté. Un fournisseur qui ne la fournit pas ne peut pas être départagé d'un fournisseur qui la fournit mauvaise.

Les cinq signaux qui doivent alerter

  • Aucun chromatogramme, seulement un chiffre. Le chiffre sans la trace n’est pas une mesure, c’est une affirmation.
  • Un COA générique valable pour toutes les références du catalogue, sans numéro de lot correspondant à votre flacon.
  • Une masse observée qui ne correspond pas à la masse théorique. Un écart de 22 Da signale un adduit sodium, un écart de 16 Da une oxydation.
  • Pas de date d’analyse, ou une date postérieure à la date d’expédition.
  • Une pureté annoncée à trois décimales. La répétabilité de la méthode ne le permet pas ; c’est un habillage.

Ce que doit contenir un COA exploitable

SectionCe qu’elle doit indiquer
IdentificationNom, séquence, numéro de catalogue, numéro de lot, date d’analyse.
HPLCColonne, gradient, débit, longueur d’onde, temps de rétention, chromatogramme, pureté (%).
Spectrométrie de masseMéthode (ESI ou MALDI), masse théorique, masse observée, spectre.
Teneur nettePourcentage de peptide dans la masse totale, et méthode utilisée.
Contre-ionNature (TFA, acétate) et proportion.
Aspect et conservationÉtat physique, couleur, conditions de stockage recommandées.